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幾種常用免疫組(zu)化(hua)方法(fa)簡單介紹
1)免疫熒光方法
elisa試劑盒 是(shi)zui早(zao)建立的免疫(yi)組織(zhi)化學技術(shu)。它利用(yong)抗(kang)原(yuan)抗(kang)體(ti)(ti)特異性結合的原(yuan)理(li),先(xian)將(jiang)已(yi)知抗(kang)體(ti)(ti)標上熒(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)素,以此作為探針檢查(cha)細胞或組織(zhi)內的相(xiang)應抗(kang)原(yuan),在(zai)熒(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)顯微鏡下觀察。當抗(kang)原(yuan)抗(kang)體(ti)(ti)復合物中(zhong)(zhong)的熒(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)素受激發光(guang)(guang)(guang)的照射后即會發出(chu)一(yi)定(ding)波長的熒(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang),從而可確(que)定(ding)組織(zhi)中(zhong)(zhong)某種(zhong)抗(kang)原(yuan)的定(ding)位,進而還可進行定(ding)量分析(xi)。由于免疫(yi)熒(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)技術(shu)特異性強(qiang)、靈敏度高、快速簡(jian)便,所(suo)以在(zai)臨床(chuang)病理(li)診斷、檢驗(yan)中(zhong)(zhong)應用(yong)較廣。
2)免疫酶標方法
免疫(yi)酶標方法(fa)是(shi)(shi)繼免疫(yi)熒(ying)光(guang)后,于60年代發(fa)展起(qi)來的(de)(de)技術(shu)。基本(ben)原(yuan)(yuan)理(li)是(shi)(shi)先以酶標記(ji)的(de)(de)抗體(ti)與組織或(huo)細胞(bao)作用,然(ran)后加(jia)入酶的(de)(de)底物,生成(cheng)有(you)(you)色的(de)(de)不(bu)溶性產物或(huo)具有(you)(you)一定(ding)電(dian)子密度(du)的(de)(de)顆粒,通過(guo)光(guang)鏡(jing)(jing)或(huo)電(dian)鏡(jing)(jing),對細胞(bao)表面和細胞(bao)內的(de)(de)各種抗原(yuan)(yuan)成(cheng)分進(jin)行定(ding)位研(yan)究。免疫(yi)酶標技術(shu)是(shi)(shi)目(mu)(mu)前zui常(chang)用的(de)(de)技術(shu)。該方法(fa)與免elisa試劑(ji)盒疫(yi)熒(ying)光(guang)技術(shu)相比(bi)的(de)(de)主要優點是(shi)(shi):定(ding)位準(zhun)確(que),對比(bi)度(du)好,染色標本(ben)可長期(qi)保(bao)存(cun),適合(he)于光(guang)、電(dian)鏡(jing)(jing)研(yan)究等(deng)。免疫(yi)酶標方法(fa)的(de)(de)發(fa)展非常(chang)迅(xun)速,已經衍生出了多種標記(ji)方法(fa),且隨著方法(fa)的(de)(de)不(bu)斷(duan)改進(jin)和創新,其特(te)異(yi)性和靈敏(min)度(du)都在不(bu)斷(duan)提(ti)高,使(shi)用也越來越方便。目(mu)(mu)前在病理(li)診斷(duan)中廣(guang)為使(shi)用的(de)(de)有(you)(you)ABC法(fa)、SP三(san)步(bu)法(fa)、即用型(xing)二步(bu)法(fa)檢測(ce)系統等(deng)。
3)免疫膠體金技術
免(mian)(mian)疫(yi)(yi)膠(jiao)(jiao)體(ti)(ti)金(jin)(jin)技(ji)術(shu)是以膠(jiao)(jiao)體(ti)(ti)金(jin)(jin)這樣一(yi)種特(te)殊的(de)(de)(de)金(jin)(jin)屬顆粒作為標(biao)記(ji)物(wu)。膠(jiao)(jiao)體(ti)(ti)金(jin)(jin)是指金(jin)(jin)的(de)(de)(de)水溶(rong)膠(jiao)(jiao),它能迅速而穩(wen)定(ding)地吸(xi)附蛋白,對蛋白的(de)(de)(de)生物(wu)學活性(xing)則沒有明(ming)顯的(de)(de)(de)影(ying)響。因此,用(yong)膠(jiao)(jiao)體(ti)(ti)金(jin)(jin)標(biao)記(ji)一(yi)抗(kang)(kang)、二抗(kang)(kang)或(huo)其他elisa試劑(ji)盒能特(te)異性(xing)結合免(mian)(mian)疫(yi)(yi)球蛋白的(de)(de)(de)分子(zi)(如(ru)(ru)葡萄球菌A蛋白)等作為探針,就(jiu)能對組(zu)織或(huo)細胞內的(de)(de)(de)抗(kang)(kang)原進(jin)行定(ding)性(xing)、定(ding)位,甚至定(ding)量(liang)研(yan)究。由于(yu)(yu)(yu)膠(jiao)(jiao)體(ti)(ti)金(jin)(jin)有不同大小的(de)(de)(de)顆粒,且膠(jiao)(jiao)體(ti)(ti)金(jin)(jin)的(de)(de)(de)電(dian)子(zi)密度高(gao),所以免(mian)(mian)疫(yi)(yi)膠(jiao)(jiao)體(ti)(ti)金(jin)(jin)技(ji)術(shu)特(te)別適(shi)合于(yu)(yu)(yu)免(mian)(mian)疫(yi)(yi)電(dian)鏡的(de)(de)(de)單標(biao)記(ji)或(huo)多標(biao)記(ji)定(ding)位研(yan)究。由于(yu)(yu)(yu)膠(jiao)(jiao)體(ti)(ti)金(jin)(jin)本(ben)身(shen)呈淡至深紅色,因此也適(shi)合進(jin)行光鏡觀(guan)察。如(ru)(ru)應用(yong)銀加強的(de)(de)(de)免(mian)(mian)疫(yi)(yi)金(jin)(jin)銀法則更便(bian)于(yu)(yu)(yu)光鏡觀(guan)察。