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高(gao)靈敏度快速檢測紅(hong)細胞(bao)中亞鐵(tie)血紅(hong)素含量(liang)的方法(fa)
在實驗室(shi)條件下快速準確的(de)檢測出(chu)亞鐵血(xue)(xue)紅素(su)的(de)含量是十(shi)分重(zhong)要(yao)(yao)的(de),其(qi)重(zhong)要(yao)(yao)程(cheng)度(du)正如胞內血(xue)(xue)紅蛋(dan)白在新陳代謝中(zhong)所扮演的(de)重(zhong)要(yao)(yao)角(jiao)色。Jason R. Marcero 等(deng)研究者(zhe)將傳統的檢(jian)測(ce)方法(吡啶血色原檢(jian)測(ce)法,熒光亞鐵(tie)血紅素檢(jian)測(ce)法)與采(cai)用CLARiTY分光光度(du)計實施的(de)以光譜技術(shu)為基礎的(de)檢(jian)(jian)測(ce)方法相比較。用(yong)以上三種檢(jian)(jian)測(ce)方法檢(jian)(jian)測(ce)血紅(hong)(hong)蛋白標準液,老鼠全血,小鼠紅(hong)(hong)白血病細(xi)胞(MEL)以及小鼠K562細胞,檢測(ce)結果(guo)顯示(shi)所有(you)樣本均富含與(yu)血紅(hong)蛋白(bai)相(xiang)結合的(de)亞鐵血紅(hong)素。然(ran)而在亞鐵血紅(hong)素的(de)檢測(ce)過(guo)程(cheng)中,吡啶血色原檢測(ce)方法(fa)顯示(shi)出zui大的(de)線性范(fan)圍,三種檢測(ce)方法(fa)的(de)靈(ling)敏度和檢測(ce)量(~1uM)均(jun)相(xiang)似(si)。熒光(guang)檢測(ce)法在微量樣品的檢測(ce)方面表現出(chu)其*性。將CLARiTY系(xi)統(tong)與吡啶血色原以及(ji)細胞(bao)計數相結(jie)合,使得0.46 uM-1 cm-1的血液、MEL細胞、K562細胞中的血紅蛋(dan)白的消光系數(shu)能(neng)夠被測(ce)定(ding)(ding)。這一測(ce)量數(shu)值(zhi)可用(yong)于(yu)測(ce)定(ding)(ding)EML細胞血紅蛋白(bai)隨誘導素的添(tian)加量的變化情況,從而反映出誘導素對(dui)亞鐵血紅素生(sheng)物合成的影(ying)響。
原文:
Jason R. Marcero, Robert B. Piel III, Joseph S. Burch, and Harry A. Dailey. Rapid and sensitive quantitation of heme in hemoglobinized cells. BioTechniques 61:83-91 (August 2016).