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      TaqMan探針作(zuo)為(wei)阻斷(duan)劑參與突變基因(yin)的(de)PCR擴(kuo)增和DNA熔解分析

含(han)TaqMan探針(zhen)的非對稱PCR以(yi)及DNA熔解(jie)分析(xi)被應用于突(tu)變檢(jian)測，可有效用于臨(lin)床(chuang)診斷。該(gai)方法簡單、成(cheng)本低，在(zai)一個封閉的離心管(guan)中進行，可zui大(da)限度的減少反應時間(jian)，減輕工作量，以及避(bi)免樣品間(jian)的交(jiao)叉污染。盡(jin)管(guan)DNA熔解分析(xi)比DNA常規測序更加(jia)靈敏（兩者的突(tu)變(bian)檢測閾值分別為～5%和15%～20%），但相比與那些工作(zuo)量大(da)且昂貴(gui)的生物技術，如焦磷(lin)酸測序和(he)微滴型數字PCR而言，其靈(ling)敏度相差(cha)甚遠。Irina V. Botezatu等科學家證明(ming)，在一些(xie)特殊的(de)非對稱PCR情況(kuang)下，TaqMan探針可作為阻斷劑，能夠優先阻斷野生型等(deng)位基因的擴增，從(cong)而導(dao)致突變型等(deng)位基因的大量擴增。因此，使(shi)得BRAF和NRAS突變基因的檢(jian)測靈敏度增加了(le)10倍。

原文：

Irina V. Botezatu, Irina O. Panchuk, Anna M. Stroganova, et al. TaqMan probes as blocking agents for enriched PCR amplification and DNA melting analysis of mutant genes. BioTechniques 62:62-68 (February 2017).