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介紹：
ELISA試(shi)劑盒(he)(he)在國內(nei)有許多種叫法，例如：ELISA檢測(ce)(ce)試(shi)劑盒(he)(he)、ELISA Kit、酶(mei)聯免疫試(shi)劑盒(he)(he)、酶(mei)聯免疫吸(xi)(xi)附測(ce)(ce)定(ding)試(shi)劑盒(he)(he)、酶(mei)聯免疫分析試(shi)劑盒(he)(he)、酶(mei)免試(shi)劑盒(he)(he)等，比較(jiao)常見的(de)叫法是ELISA檢測(ce)(ce)試(shi)劑盒(he)(he)、酶(mei)聯免疫吸(xi)(xi)附測(ce)(ce)定(ding)試(shi)劑盒(he)(he)等。
Elisa生物試(shi)驗是一種敏感性高，特異性強(qiang)，重(zhong)復性好的實(shi)驗診斷方法。由于其試(shi)劑穩定、易保(bao)存(cun)，操作(zuo)簡便，結果判斷較客觀等因素，已廣泛應用(yong)在免疫學檢驗的各(ge)領(ling)域(yu)中。
特點：
1.高效、靈敏、特異的抗體。
2.穩定的重復性和可靠性。
3.吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體。
4.適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養上清液、尿液等多種標本類型。
5.節省實驗經費。
操作方法
1.標準品的(de)稀釋，請按照說明書進(jin)行操作。
2.根據(ju)(ju)待測(ce)樣品(pin)數(shu)(shu)量(liang)加上標準品(pin)的(de)數(shu)(shu)量(liang)決定所需的(de)板條數(shu)(shu)。每個(ge)標準品(pin)和空(kong)白孔(kong)(kong)(kong)建議(yi)做(zuo)(zuo)復孔(kong)(kong)(kong)。每個(ge)樣品(pin)根據(ju)(ju)自己的(de)數(shu)(shu)量(liang)來定，能使(shi)用復孔(kong)(kong)(kong)的(de)盡量(liang)做(zuo)(zuo)復孔(kong)(kong)(kong)。
3. 加樣：不規(gui)范的移液操作可能(neng)帶來誤(wu)差。
1）空(kong)白孔(kong)，空(kong)白對照孔(kong)不加樣品(pin)，生物素標記的抗NE抗體，鏈霉親和素-HRP，只加顯色劑(ji)A&B和終止液(ye)，其余各步操作相同；
2）標(biao)準品孔：加(jia)入標(biao)準品50ul，鏈霉(mei)親和素-HRP50ul(標(biao)準品中已事先整合好生物(wu)素抗體，故(gu)不加(jia))；
3）待測樣(yang)品(pin)孔：加入(ru)樣(yang)本40ul，然后各加入(ru)抗NE抗體10ul、鏈霉親和素-HRP50ul，蓋上封板膜，輕輕震(zhen)蕩混勻，37℃溫(wen)育60分鐘。
4. 配液(ye)：將30倍濃縮(suo)洗(xi)滌(di)液(ye)用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5. 洗滌：小心揭掉封(feng)板膜，棄(qi)去液體，甩干，每孔加滿(man)洗滌液，靜置30秒后棄(qi)去，如此重(zhong)復5次，拍干。
6. 顯(xian)色：每孔先(xian)加入顯(xian)色劑(ji)A50ul，再(zai)加入顯(xian)色劑(ji)B50μl，輕輕震蕩混(hun)勻，37℃避光(guang)顯(xian)色15分鐘。
7. 終止：每孔(kong)加終止液50μl，終止反(fan)應(ying)（此時藍色立(li)轉黃色）。
8. 測定：以(yi)空白孔(kong)調零，450nm波長依(yi)序測量(liang)各孔(kong)的(de)吸(xi)光度（OD值(zhi)）。測定應在加終止液后10分鐘以(yi)內進(jin)行(xing)。
9. 根據標(biao)準品(pin)的(de)濃(nong)(nong)度及對應的(de)OD值計(ji)算(suan)出(chu)標(biao)準曲線的(de)直線回歸(gui)方程，再(zai)根據樣品(pin)的(de)OD值在(zai)回歸(gui)方程上計(ji)算(suan)出(chu)對應的(de)樣品(pin)濃(nong)(nong)度。也可以使用(yong)各種應用(yong)軟件來(lai)計(ji)算(suan)。
洗板方法
一(yi)、手工(gong)洗板方法(fa)：
甩(shuai)掉酶(mei)標板內(nei)的液體；在實驗臺(tai)上(shang)鋪墊幾層吸水紙(zhi)，酶(mei)標板朝下用力拍幾次(ci)；將稀釋后的洗滌液至少(shao)0.35ml注(zhu)入孔(kong)內(nei)，浸泡1-2分(fen)鐘。根(gen)據需(xu)要(yao)，重復此過程數(shu)次(ci)。
二、自動洗板：
如果有自動洗板機，應在熟練使用(yong)后再用(yong)到正式實驗過程中。
注意事項
1.從2-8℃取出的試劑盒，在開啟試劑盒之前要(yao)室溫平衡至少(shao)30分鐘。酶標包被板開封后(hou)如未(wei)用完，板條應裝入(ru)密封袋中保存。
2.各步加樣均應使(shi)用加樣器，并經(jing)常(chang)校(xiao)對(dui)其準確性，以避(bi)免試(shi)驗(yan)誤(wu)差。
3.嚴格按(an)照說明書的操作進(jin)行(xing)，試驗結果判定必(bi)須以酶(mei)標儀讀(du)數為準。
4.為避(bi)免(mian)(mian)交叉污染(ran)，要避(bi)免(mian)(mian)重(zhong)復使用手(shou)中(zhong)的吸頭和封板膜。
5.不同(tong)批次試劑盒不能混用(yong)，如遇試劑不夠，請(qing)及時聯系客服解決
6.底物B對光敏感，避免(mian)長時間暴(bao)露于光下。
7.中、英文說(shuo)明書或許會有不(bu)一(yi)致(zhi)之處，請以(yi)英文說(shuo)明書為準。
8.保存溫度：2-8℃。
9.有效期：6個月(2-8℃)。
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