欧美激情综合五月色丁香,开心五月综合激情综合五月,丁香色情五月综合网站,播五月色五月开心五月网,色婷婷六月亚洲婷婷丁香,丁香五六月婷婷,五月丁香激色婷五月天

一、細胞培養準備工作

準(zhun)備(bei)(bei)(bei)工(gong)作(zuo)對開展(zhan)細胞培養(yang)異常重(zhong)要(yao)，工(gong)作(zuo)量也較大，應給(gei)予足夠的(de)(de)重(zhong)視，準(zhun)備(bei)(bei)(bei)工(gong)作(zuo)中某一環節的(de)(de)疏忽可導致實驗失敗或無法進行。準(zhun)備(bei)(bei)(bei)工(gong)作(zuo)的(de)(de)內容包括(kuo)器皿(min)的(de)(de)清洗、干燥與(yu)(yu)消(xiao)毒(du)，培養(yang)基與(yu)(yu)其他試劑的(de)(de)配制、分裝及(ji)滅(mie)菌(jun)，無菌(jun)室或超(chao)凈臺的(de)(de)清潔(jie)與(yu)(yu)消(xiao)毒(du)，培養(yang)箱及(ji)其他儀器的(de)(de)檢查與(yu)(yu)調試，具體內容可參閱(yue)有關文(wen)獻。

二、細胞培養取材

在無菌(jun)環境下從機(ji)體取出某(mou)種(zhong)(zhong)組(zu)(zu)(zu)織(zhi)(zhi)(zhi)細胞(bao)（視(shi)實驗目(mu)的(de)(de)(de)而定），經過一定的(de)(de)(de)處理(li)（如(ru)消化(hua)分(fen)(fen)散細胞(bao)、分(fen)(fen)離等）后接入培(pei)(pei)(pei)養(yang)器皿(min)中(zhong)，這一過程(cheng)稱為取材。如(ru)是(shi)細胞(bao)株的(de)(de)(de)擴大培(pei)(pei)(pei)養(yang)則無取材這一過程(cheng)。機(ji)體取出的(de)(de)(de)組(zu)(zu)(zu)織(zhi)(zhi)(zhi)細胞(bao)的(de)(de)(de)培(pei)(pei)(pei)養(yang)稱為原代培(pei)(pei)(pei)養(yang)。理(li)論上(shang)(shang)講各種(zhong)(zhong)動物和人體內的(de)(de)(de)所有組(zu)(zu)(zu)織(zhi)(zhi)(zhi)都可(ke)(ke)以用于(yu)培(pei)(pei)(pei)養(yang)，實際上(shang)(shang)幼體組(zu)(zu)(zu)織(zhi)(zhi)(zhi)（尤其(qi)是(shi)胚胎組(zu)(zu)(zu)織(zhi)(zhi)(zhi)）比成年個(ge)體的(de)(de)(de)組(zu)(zu)(zu)織(zhi)(zhi)(zhi)容(rong)易培(pei)(pei)(pei)養(yang)，分(fen)(fen)化(hua)程(cheng)度低的(de)(de)(de)組(zu)(zu)(zu)織(zhi)(zhi)(zhi)比分(fen)(fen)化(hua)高的(de)(de)(de)容(rong)易培(pei)(pei)(pei)養(yang)，腫瘤組(zu)(zu)(zu)織(zhi)(zhi)(zhi)比正常組(zu)(zu)(zu)織(zhi)(zhi)(zhi)容(rong)易培(pei)(pei)(pei)養(yang)。取材后應立即(ji)處理(li)，盡快培(pei)(pei)(pei)養(yang)，因故不能馬上(shang)(shang)培(pei)(pei)(pei)養(yang)時(shi)，可(ke)(ke)將組(zu)(zu)(zu)織(zhi)(zhi)(zhi)塊切成黃豆般大的(de)(de)(de)小塊，置4℃的(de)(de)(de)培(pei)(pei)(pei)養(yang)液中(zhong)保存(cun)。取組(zu)(zu)(zu)織(zhi)(zhi)(zhi)時(shi)應嚴格保持無菌(jun)，同時(shi)也要避免(mian)接觸其(qi)他的(de)(de)(de)有害物質。取病理(li)組(zu)(zu)(zu)織(zhi)(zhi)(zhi)和皮膚(fu)及(ji)消化(hua)道上(shang)(shang)皮細胞(bao)時(shi)容(rong)易帶菌(jun)，為減少污(wu)染(ran)可(ke)(ke)用抗菌(jun)素處理(li)。由組(zu)(zu)(zu)織(zhi)(zhi)(zhi)并(bing)分(fen)(fen)離分(fen)(fen)散細胞(bao)的(de)(de)(de)方法(fa)可(ke)(ke)參閱有關文獻(xian)。

三、細胞的培養

將取得(de)的(de)組(zu)(zu)織細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)接(jie)入(ru)(ru)培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)瓶(ping)或培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)板中(zhong)(zhong)(zhong)的(de)過(guo)程稱為培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)。如(ru)系(xi)組(zu)(zu)織塊培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)，則(ze)直接(jie)將組(zu)(zu)織塊接(jie)入(ru)(ru)培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)器皿(min)底(di)部，幾個小(xiao)時后(hou)組(zu)(zu)織塊可貼(tie)牢(lao)在(zai)(zai)(zai)底(di)部，再加入(ru)(ru)培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)基。如(ru)系(xi)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)，一(yi)(yi)(yi)(yi)(yi)般應(ying)在(zai)(zai)(zai)接(jie)入(ru)(ru)培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)器皿(min)之(zhi)前進(jin)行(xing)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)計數(shu)，按要求以(yi)一(yi)(yi)(yi)(yi)(yi)定(ding)的(de)量（以(yi)每毫升細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)數(shu)表示）接(jie)入(ru)(ru)培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)器皿(min)并直接(jie)加入(ru)(ru)培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)基。細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)進(jin)入(ru)(ru)培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)器皿(min)后(hou)，立即放入(ru)(ru)培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)箱中(zhong)(zhong)(zhong)，使細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)盡早進(jin)入(ru)(ru)生(sheng)長狀態(tai)(tai)。正(zheng)在(zai)(zai)(zai)培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)中(zhong)(zhong)(zhong)的(de)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)應(ying)每隔一(yi)(yi)(yi)(yi)(yi)定(ding)時間觀(guan)察一(yi)(yi)(yi)(yi)(yi)次(ci)，觀(guan)察的(de)內(nei)容包括細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)是否生(sheng)長良(liang)好，形態(tai)(tai)是否正(zheng)常(chang)，有無(wu)(wu)污染，培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)基的(de)PH是否太酸或太堿（由酚(fen)紅指(zhi)示劑(ji)指(zhi)示），此外對培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)溫度和CO2濃(nong)度也要定(ding)時檢查。一(yi)(yi)(yi)(yi)(yi)般原代(dai)(dai)(dai)培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)進(jin)入(ru)(ru)培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)后(hou)有一(yi)(yi)(yi)(yi)(yi)段潛伏(fu)(fu)期(qi)（數(shu)小(xiao)時到(dao)數(shu)十天不等），在(zai)(zai)(zai)潛伏(fu)(fu)期(qi)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)一(yi)(yi)(yi)(yi)(yi)般不分(fen)裂，但可貼(tie)壁和游走。過(guo)了(le)潛伏(fu)(fu)期(qi)后(hou)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)進(jin)入(ru)(ru)旺盛(sheng)的(de)分(fen)裂生(sheng)長期(qi)。細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)長滿瓶(ping)底(di)后(hou)要進(jin)行(xing)傳(chuan)代(dai)(dai)(dai)培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)，將一(yi)(yi)(yi)(yi)(yi)瓶(ping)中(zhong)(zhong)(zhong)的(de)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)消化(hua)懸浮后(hou)分(fen)至兩(liang)到(dao)三(san)瓶(ping)繼續培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)。每傳(chuan)代(dai)(dai)(dai)一(yi)(yi)(yi)(yi)(yi)次(ci)稱為“一(yi)(yi)(yi)(yi)(yi)代(dai)(dai)(dai)"。二倍體細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)一(yi)(yi)(yi)(yi)(yi)般只能傳(chuan)幾十代(dai)(dai)(dai)，而轉(zhuan)化(hua)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)系(xi)或細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)株則(ze)可無(wu)(wu)限(xian)地(di)傳(chuan)代(dai)(dai)(dai)下去。轉(zhuan)化(hua)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)可能具有惡性(xing)(xing)性(xing)(xing)質，也可能僅有不死性(xing)(xing)（Immortality）而無(wu)(wu)惡性(xing)(xing)。培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)正(zheng)在(zai)(zai)(zai)生(sheng)長中(zhong)(zhong)(zhong)的(de)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)是進(jin)行(xing)各種生(sheng)物醫(yi)學(xue)實驗(yan)的(de)良(liang)好材料。

四、凍存及復蘇

為(wei)了(le)保(bao)存(cun)(cun)(cun)細胞(bao)，特別是不易獲得的(de)突變型細胞(bao)或細胞(bao)株，要將細胞(bao)凍存(cun)(cun)(cun)。凍存(cun)(cun)(cun)的(de)溫(wen)(wen)度(du)(du)(du)一般(ban)(ban)用液(ye)氮的(de)溫(wen)(wen)度(du)(du)(du)—－196℃，將細胞(bao)收(shou)集至凍存(cun)(cun)(cun)管(guan)中(zhong)(zhong)加入(ru)含(han)保(bao)護劑(ji)（一般(ban)(ban)為(wei)二甲亞砜(feng)或甘油）的(de)培養(yang)基，以一定的(de)冷卻速(su)(su)(su)度(du)(du)(du)凍存(cun)(cun)(cun)，zui終保(bao)存(cun)(cun)(cun)于液(ye)氮中(zhong)(zhong)。在極(ji)低的(de)溫(wen)(wen)度(du)(du)(du)下，細胞(bao)保(bao)存(cun)(cun)(cun)的(de)時間幾(ji)乎是無限的(de)。復蘇一般(ban)(ban)采用快融方(fang)法，即從液(ye)氮中(zhong)(zhong)取出凍存(cun)(cun)(cun)管(guan)后(hou)，立即放(fang)入(ru)37℃水中(zhong)(zhong)，使之在一分鐘內迅速(su)(su)(su)融解。然后(hou)將細胞(bao)轉(zhuan)入(ru)培養(yang)器皿(min)中(zhong)(zhong)進(jin)行培養(yang)。凍存(cun)(cun)(cun)過程(cheng)中(zhong)(zhong)保(bao)護劑(ji)的(de)選用、細胞(bao)密度(du)(du)(du)、降(jiang)溫(wen)(wen)速(su)(su)(su)度(du)(du)(du)及復蘇時溫(wen)(wen)度(du)(du)(du)、融化速(su)(su)(su)度(du)(du)(du)等都對細胞(bao)活(huo)力有影響。

細胞培養一般條件編輯

簡言(yan)之(zhi)，即細(xi)(xi)胞(bao)需要什么就(jiu)提供什么，道理是如(ru)此，真正能做到這點尚需時日，人們(men)至今(jin)對細(xi)(xi)胞(bao)的(de)(de)生命周期控制(zhi)機理認識不足，癌(ai)細(xi)(xi)胞(bao)雖然也來自正常細(xi)(xi)胞(bao)，但至今(jin)不知(zhi)道究竟為什么癌(ai)細(xi)(xi)胞(bao)很難停止已(yi)經啟動的(de)(de)有害分(fen)裂，盡管如(ru)此，人們(men)長期的(de)(de)研究結(jie)果表明，離(li)體細(xi)(xi)胞(bao)培養需要的(de)(de)基(ji)本條件(jian)就(jiu)是下(xia)列細(xi)(xi)胞(bao)生理條件(jian)。

⑴溫度

溫度過低時細胞生長緩慢甚至不生長。利用冷凍保藏細胞可保持細胞的原有分裂分化能力。溫度過高導致細胞死亡。這主要是由酶和蛋白質所需要的zui適溫度決定的。多數生物大分子遇到高溫后容易導致空間結構改變或者喪失（變性）。細胞膜遇到高溫后容易變tai。在自然界，既有耐高溫的生物對付環境的機(ji)制研究在(zai)生物進化和農業(ye)、環保、發酵工業(ye)中(zhong)意義重(zhong)大。