欧美激情综合五月色丁香,开心五月综合激情综合五月,丁香色情五月综合网站,播五月色五月开心五月网,色婷婷六月亚洲婷婷丁香,丁香五六月婷婷,五月丁香激色婷五月天

產品列表PRODUCTS LIST

首頁 > 公司動態 > 生化試劑應用常見問題的探討
生化試劑應用常見問題的探討
點擊次數:3898 更新時間:2016-03-21

 1 試劑空白

試(shi)(shi)劑空(kong)(kong)(kong)(kong)白吸(xi)(xi)光(guang)(guang)(guang)(guang)度(du)(du)(du)是反(fan)映(ying)試(shi)(shi)劑質(zhi)量(liang)的(de)指標之一(yi)(yi)。每種試(shi)(shi)劑都有一(yi)(yi)定的(de)空(kong)(kong)(kong)(kong)白吸(xi)(xi)光(guang)(guang)(guang)(guang)度(du)(du)(du)范(fan)圍,試(shi)(shi)劑空(kong)(kong)(kong)(kong)白吸(xi)(xi)光(guang)(guang)(guang)(guang)度(du)(du)(du)的(de)改(gai)變(bian)往往提示(shi)該試(shi)(shi)劑的(de)變(bian)質(zhi);如(ru)(ru)利用Trinder反(fan)應(ying)為(wei)(wei)(wei)(wei)原(yuan)(yuan)(yuan)理的(de)檢測(ce)(ce)試(shi)(shi)劑會因(yin)(yin)含(han)酚(fen)(fen)類物質(zhi)被氧(yang)化為(wei)(wei)(wei)(wei)醌(kun)而(er)變(bian)為(wei)(wei)(wei)(wei)紅色。堿性磷酸酶(mei)、r一(yi)(yi)谷氨酰轉(zhuan)肽酶(mei)、淀(dian)粉(fen)酶(mei)等(deng)檢測(ce)(ce)試(shi)(shi)劑會因(yin)(yin)基(ji)(ji)質(zhi)分解出(chu)(chu)硝基(ji)(ji)酚(fen)(fen)或酚(fen)(fen)基(ji)(ji)苯胺而(er)變(bian)黃(huang)。有些試(shi)(shi)劑久置(zhi)后變(bian)渾濁。這(zhe)些情況均可使空(kong)(kong)(kong)(kong)白吸(xi)(xi)光(guang)(guang)(guang)(guang)度(du)(du)(du)升高。丙氨酸氨基(ji)(ji)轉(zhuan)移酶(mei)、天冬氨酸氨基(ji)(ji)轉(zhuan)移酶(mei)等(deng)負反(fan)應(ying),在放置(zhi)過(guo)程(cheng)中其試(shi)(shi)劑空(kong)(kong)(kong)(kong)白吸(xi)(xi)光(guang)(guang)(guang)(guang)度(du)(du)(du)會因(yin)(yin)NADH自行(xing)氧(yang)化為(wei)(wei)(wei)(wei)NAD+而(er)下降(jiang)。原(yuan)(yuan)(yuan)則(ze)上,吸(xi)(xi)光(guang)(guang)(guang)(guang)度(du)(du)(du)上升的(de)反(fan)應(ying),其試(shi)(shi)劑空(kong)(kong)(kong)(kong)白吸(xi)(xi)光(guang)(guang)(guang)(guang)度(du)(du)(du)越低(di)越好(hao),不(bu)能超過(guo)一(yi)(yi)個(ge)高限(xian);相反(fan),吸(xi)(xi)光(guang)(guang)(guang)(guang)度(du)(du)(du)下降(jiang)的(de)反(fan)應(ying),其試(shi)(shi)劑空(kong)(kong)(kong)(kong)白吸(xi)(xi)光(guang)(guang)(guang)(guang)度(du)(du)(du)不(bu)能低(di)于一(yi)(yi)個(ge)低(di)限(xian)。因(yin)(yin)此(ci),試(shi)(shi)劑空(kong)(kong)(kong)(kong)白吸(xi)(xi)光(guang)(guang)(guang)(guang)度(du)(du)(du)限(xian)值,常作為(wei)(wei)(wei)(wei)程(cheng)序參數輸入儀器,如(ru)(ru)經核(he)查超限(xian),儀器會自動報(bao)警,提示(shi)更(geng)換試(shi)(shi)劑。需要指出(chu)(chu)的(de)是,還原(yuan)(yuan)(yuan)型輔酶(mei)I(或II)等(deng)投料(liao)量(liang)不(bu)足或劣質(zhi)的(de)原(yuan)(yuan)(yuan)料(liao),往往需要加大(da)用量(liang),才(cai)使“表觀(guan)”吸(xi)(xi)光(guang)(guang)(guang)(guang)度(du)(du)(du)上升,湊(cou)合過(guo)試(shi)(shi)劑空(kong)(kong)(kong)(kong)白核(he)對的(de)“關(guan)”,其后果為(wei)(wei)(wei)(wei)如(ru)(ru)下情況:

1.1 線性(xing)范圍變(bian)窄 現象:高(gao)值測不高(gao)。原因:生產試劑時有(you)效成分(fen)投(tou)料量不足;試劑成份穩定性(xing)較差。

1.2 靈敏度(du)變低現象:酶促反應速度(du)曲線斜(xie)率下降,測定結果(guo)有嚴重(zhong)系統誤差。原因:試劑底物濃度(du)不足。

1.3 低值偏高 現象:試劑(ji)(ji)空白的變(bian)化曲線(xian)(吸光度VS時間)明顯波動。原(yuan)因:試劑(ji)(ji)自(zi)身(shen)不穩定(ding),自(zi)行(xing)分解;工具(ju)酶純(chun)度不夠(gou),雜酶含量超限,導致干擾作(zuo)用。

2 樣品信息

樣品的(de)溶(rong)血(xue)(xue)、脂(zhi)血(xue)(xue)、黃疸(dan)(dan)等會(hui)對(dui)測定結(jie)果產生非化(hua)學反應(ying)的(de)干擾。因此,應(ying)根(gen)據溶(rong)血(xue)(xue)、脂(zhi)濁、黃疸(dan)(dan)的(de)光(guang)譜吸收特(te)性,采用雙波長或(huo)多波長的(de)檢測模式,并在結(jie)果計算中扣除因溶(rong)血(xue)(xue)、脂(zhi)血(xue)(xue)、黃疸(dan)(dan)引起(qi)的(de)影響,減少干擾程(cheng)度(du)。

3 測定范圍

每(mei)種待測(ce)物都有一個可測(ce)定的(de)濃度(du)或(huo)活性范(fan)圍,樣品(pin)結果(guo)(guo)若超過此(ci)范(fan)圍,分(fen)析儀(yi)將顯示結果(guo)(guo)超過范(fan)圍的(de)提(ti)示。表示試(shi)劑已經變質,應更換合格試(shi)劑。

4 底物耗盡

使用(yong)連續監測(ce)法、兩點法測(ce)定(ding)(ding)酶活(huo)(huo)性時(shi),若(ruo)酶活(huo)(huo)性非常高,底(di)物接近被耗盡,吸(xi)光(guang)度(du)上(shang)升(sheng)或下(xia)降會超過某一吸(xi)光(guang)度(du)變化(hua)范(fan)圍(wei),監測(ce)期的吸(xi)光(guang)度(du)將偏(pian)離線性,使測(ce)定(ding)(ding)結果(guo)不可靠。

5 酶的預活化

測(ce)定血清中(zhong)的(de)(de)某些酶,如(ru)(ru)CK,離體(ti)(采(cai)血)后很容易失活(huo)(huo)。失活(huo)(huo)的(de)(de)原因(yin)是酶活(huo)(huo)性(xing)中(zhong)心(xin)的(de)(de)活(huo)(huo)性(xing)基(ji)因(yin)巰基(ji)(一SH)被氧化(hua)(hua)(hua)造成的(de)(de)。只有通過(guo)適當的(de)(de)還原作用才(cai)能(neng)重新激(ji)活(huo)(huo)。如(ru)(ru)CK—NAC試(shi)劑(ji)(ji)盒(he)即含有CK活(huo)(huo)化(hua)(hua)(hua)劑(ji)(ji),名為N一乙酰(xian)半胱氨(an)酸。實驗研究(jiu)證明,NAC對血清中(zhong)已失活(huo)(huo)的(de)(de)CK活(huo)(huo)化(hua)(hua)(hua)過(guo)程約需(xu)180 S。這就是CK測(ce)定為什么要(yao)延(yan)遲時間較(jiao)長(chang)的(de)(de)理論依據。在AST,ALT采(cai)用IFCC推薦方法測(ce)定時需(xu)要(yao)磷酸吡哆醛預活(huo)(huo)化(hua)(hua)(hua)。需(xu)要(yao)強調:含有活(huo)(huo)化(hua)(hua)(hua)劑(ji)(ji)的(de)(de)生化(hua)(hua)(hua)試(shi)劑(ji)(ji),其測(ce)定酶活(huo)(huo)性(xing)的(de)(de)結果要(yao)高(gao)些。

6 校準與結果溯(su)源性

酶的校正(zheng):要滿(man)足在同一(yi)方法學、同一(yi)測(ce)定條件、與理論計(ji)算的FACTOR值(zhi)差異(yi)不大,沒有(you)發現有(you)明顯影(ying)響因素,方可進行校正(zheng)。

檢驗(yan)結果溯源(yuan)(yuan)性(xing),得建立一個(ge)可靠的參(can)考(kao)系(xi)(xi)統(tong)(tong)(tong)作為(wei)準確(que)性(xing)基礎,然后將準確(que)性(xing)轉移(yi)到常規(gui)方(fang)(fang)(fang)法測(ce)定中去(qu),使常規(gui)方(fang)(fang)(fang)法測(ce)定結果可溯源(yuan)(yuan)到參(can)考(kao)系(xi)(xi)統(tong)(tong)(tong)所(suo)提供(gong)的準確(que)性(xing)基礎上來(lai)。在(zai)實現(xian)溯源(yuan)(yuan)性(xing)目標過程中,永(yong)遠以(yi)患(huan)者新鮮標本為(wei)實驗(yan)對(dui)象,以(yi)方(fang)(fang)(fang)法學(xue)對(dui)比試(shi)驗(yan)方(fang)(fang)(fang)法為(wei)驗(yan)證手段(duan)。方(fang)(fang)(fang)法學(xue)對(dui)比試(shi)驗(yan)常采(cai)用回歸方(fang)(fang)(fang)程進行(xing)統(tong)(tong)(tong)計(ji)分析,假如(ru)斜率接近1,截距(ju)較小,這意味(wei)著實驗(yan)室常規(gui)方(fang)(fang)(fang)法對(dui)標本測(ce)定結果和溯源(yuan)(yuan)目標參(can)考(kao)系(xi)(xi)統(tong)(tong)(tong)對(dui)標本檢測(ce)結果非常接近。

臨床化學中參(can)考標(biao)準(二級標(biao)準)要有通用性,但生產廠家提供的校準液(ye)并(bing)非通用的,只適用于某一特(te)定的分析系(xi)統(tong)。

校(xiao)準(zhun)液(ye)標(biao)示值(zhi)往往是(shi)按(an)其(qi)基(ji)質偏(pian)差(cha)修正的,所(suo)以標(biao)示值(zhi)并(bing)非實際值(zhi)。校(xiao)準(zhun)液(ye)、質控血清通常是(shi)經過處理的混合人或(huo)動物(wu)血清,這種制備(bei)物(wu)在特定分析系(xi)統(tong)中往往與人新鮮血清反應性不同(tong)而產生基(ji)質偏(pian)差(cha)。如(ru)總膽固醇測(ce)定基(ji)質效應研究指出:校(xiao)準(zhun)液(ye)酶法測(ce)定回收結果偏(pian)低(di)可達(da)5%~7%。

7 試(shi)(shi)(shi)劑(ji)(ji)抗干(gan)擾(rao)作用的(de)(de)(de)(de)(de)(de)合理性(xing)(xing)(xing)(xing)有(you)(you)(you)些液(ye)體(ti)雙試(shi)(shi)(shi)劑(ji)(ji),其實(shi)(shi)質(zhi)并不真(zhen)正具(ju)(ju)備(bei)抗干(gan)擾(rao)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)能力而(er)只是解決了(le)試(shi)(shi)(shi)劑(ji)(ji)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)液(ye)體(ti)化(hua)(hua)(hua)和穩(wen)定(ding)(ding)性(xing)(xing)(xing)(xing)問題。如(ru)(ru),ALT試(shi)(shi)(shi)劑(ji)(ji)盒中(zhong),NADH在(zai)(zai)(zai)pH7.5~7.8水溶液(ye)中(zhong)極不穩(wen)定(ding)(ding),在(zai)(zai)(zai)pH>8.7時(shi)(shi)才能穩(wen)定(ding)(ding)保(bao)存(cun)。因此(ci),為(wei)了(le)保(bao)證試(shi)(shi)(shi)劑(ji)(ji)穩(wen)定(ding)(ding)性(xing)(xing)(xing)(xing),液(ye)體(ti)雙試(shi)(shi)(shi)劑(ji)(ji)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)R1需要(yao)(yao)(yao)維(wei)持(chi)pH>8.7,但此(ci)時(shi)(shi)LDH活性(xing)(xing)(xing)(xing)大(da)大(da)下降(jiang),就(jiu)失(shi)去(qu)消(xiao)(xiao)(xiao)(xiao)除內源(yuan)性(xing)(xing)(xing)(xing)丙酮酸的(de)(de)(de)(de)(de)(de)功能,只有(you)(you)(you)加(jia)入(ru)試(shi)(shi)(shi)劑(ji)(ji)R2后(hou),反應(ying)(ying)混合液(ye)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)pH下降(jiang)至LDHzui適pH,在(zai)(zai)(zai)經過(guo)延(yan)遲(chi)時(shi)(shi)間60 S后(hou),才能消(xiao)(xiao)(xiao)(xiao)除內源(yuan)性(xing)(xing)(xing)(xing)丙酮酸的(de)(de)(de)(de)(de)(de)干(gan)擾(rao)。再如(ru)(ru),Tfinder反應(ying)(ying)中(zhong)抗Vc干(gan)擾(rao)問題:由(you)于(yu)維(wei)生(sheng)(sheng)素c易(yi)氧化(hua)(hua)(hua),樣(yang)(yang)品(pin)中(zhong)Vc會(hui)(hui)競爭反應(ying)(ying)生(sheng)(sheng)成(cheng)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)過(guo)氧化(hua)(hua)(hua)氫,而(er)產生(sheng)(sheng)負干(gan)擾(rao)。因此(ci),在(zai)(zai)(zai)試(shi)(shi)(shi)劑(ji)(ji)R1中(zhong)加(jia)入(ru)抗壞(huai)血酸氧化(hua)(hua)(hua)酶,這種方(fang)(fang)(fang)法(fa)(fa)是有(you)(you)(you)效(xiao)的(de)(de)(de)(de)(de)(de),但不一(yi)(yi)定(ding)(ding)有(you)(you)(you)很大(da)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)意義。因為(wei)Vc干(gan)擾(rao)必(bi)須同時(shi)(shi)具(ju)(ju)備(bei)二個(ge)條件:a)Vc攝入(ru)量較多;b)采血后(hou)立即測(ce)定(ding)(ding)。實(shi)(shi)驗(yan)表明離(li)體(ti)血清中(zhong)Vc在(zai)(zai)(zai)90 min后(hou)會(hui)(hui)全部被氧化(hua)(hua)(hua)。又如(ru)(ru),使用胺類新(xin)色原。a)分(fen)子共(gong)軛結構(gou)特性(xing)(xing)(xing)(xing)使得(de)靈敏度提高,相應(ying)(ying)可以(yi)(yi)減(jian)少(shao)樣(yang)(yang)本用量,zui終能有(you)(you)(you)效(xiao)地降(jiang)低(di)干(gan)擾(rao)物的(de)(de)(de)(de)(de)(de)量.b)使生(sheng)(sheng)成(cheng)胺類色素原zui大(da)吸收峰由(you)500~520 nm移至550 nm以(yi)(yi)上,以(yi)(yi)避(bi)(bi)開黃疸、溶血干(gan)擾(rao)。如(ru)(ru):亞鐵(tie)(tie)一(yi)(yi)H 0 ,能有(you)(you)(you)效(xiao)避(bi)(bi)免黃疸干(gan)擾(rao)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)理論依據是亞鐵(tie)(tie)與H。0。親和力遠遠大(da)于(yu)膽紅素。甘(gan)油(you)(you)三酯(zhi)測(ce)定(ding)(ding),有(you)(you)(you)人主張(zhang)選用雙試(shi)(shi)(shi)劑(ji)(ji)方(fang)(fang)(fang)法(fa)(fa)消(xiao)(xiao)(xiao)(xiao)除內源(yuan)性(xing)(xing)(xing)(xing)甘(gan)油(you)(you),這個(ge)方(fang)(fang)(fang)法(fa)(fa)是可行的(de)(de)(de)(de)(de)(de),但忽視了(le)一(yi)(yi)個(ge)化(hua)(hua)(hua)學平衡理論。因為(wei)所有(you)(you)(you)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)酯(zhi)在(zai)(zai)(zai)水溶液(ye)中(zhong)都不是簡單地以(yi)(yi)酯(zhi)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)形(xing)式存(cun)在(zai)(zai)(zai),而(er)是以(yi)(yi)水解與酯(zhi)化(hua)(hua)(hua)相平衡的(de)(de)(de)(de)(de)(de)形(xing)式存(cun)在(zai)(zai)(zai)。在(zai)(zai)(zai)一(yi)(yi)個(ge)平衡體(ti)系中(zhong),如(ru)(ru)果去(qu)除游離(li)甘(gan)油(you)(you),這個(ge)平衡就(jiu)向生(sheng)(sheng)成(cheng)甘(gan)油(you)(you)方(fang)(fang)(fang)向移動(dong),甘(gan)油(you)(you)三酯(zhi)就(jiu)會(hui)(hui)重(zhong)新(xin)水解,生(sheng)(sheng)成(cheng)新(xin)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)甘(gan)油(you)(you),達到新(xin)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)平衡,因此(ci)樣(yang)(yang)品(pin)與R1試(shi)(shi)(shi)劑(ji)(ji)孵育時(shi)(shi)間越長,測(ce)得(de)甘(gan)油(you)(you)三酯(zhi)值就(jiu)越低(di)。甘(gan)油(you)(you)三酯(zhi)測(ce)定(ding)(ding),不僅要(yao)(yao)(yao)去(qu)除游離(li)甘(gan)油(you)(you),而(er)且還(huan)要(yao)(yao)(yao)克服樣(yang)(yang)本含量真(zhen)實(shi)(shi)性(xing)(xing)(xing)(xing)發生(sheng)(sheng)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)變化(hua)(hua)(hua),試(shi)(shi)(shi)劑(ji)(ji)中(zhong)必(bi)須加(jia)入(ru)甘(gan)油(you)(you)激酶,并且延(yan)遲(chi)時(shi)(shi)間要(yao)(yao)(yao)標(biao)準化(hua)(hua)(hua)。所以(yi)(yi),一(yi)(yi)些試(shi)(shi)(shi)驗(yan)項(xiang)目(mu)在(zai)(zai)(zai)消(xiao)(xiao)(xiao)(xiao)除內源(yuan)性(xing)(xing)(xing)(xing)物質(zhi)干(gan)擾(rao)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)同時(shi)(shi),會(hui)(hui)帶來(lai)樣(yang)(yang)品(pin)含量真(zhen)實(shi)(shi)性(xing)(xing)(xing)(xing)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)變化(hua)(hua)(hua)。